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Miura y K. Tanaka,en Nucleic acids research 21, describen el aislamiento y la caracterización de la región promotora del gen HNF-1 de rata en células HepG2. En una realización, la invención contempla los métodos diabetes klinik mapa de bad nauheim rastrear la diabetes mellitus.

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El diabetes klinik mapa de bad nauheim permite la diagnosis casi de cualquier mutación, incluyendo, por ejemplo, mutaciones puntuales, mutaciones por traslocación, mutaciones por deleción, y mutaciones por inserción. En la invención también se contempla el uso para preparar un medicamento para tratar la diabetes en un animal que comprende: diagnosticar un animal que diabetes klinik mapa de bad nauheim diabetes y modular la función de HNF en el animal. Estos moduladores pueden ser formulados en un compuesto farmacéutico para la liberación en el animal.

Semejante modulador de HNF puede ser preparado o preparable mediante un procedimiento que comprende rastrear los moduladores de la función de HNF que comprende: obtener un polipéptido HNF; determinar un perfil de actividad normalizada del polipéptido HNF; poner en contacto el polipéptido HNF con un supuesto modulador; y someter a ensayo el cambio en el perfil de actividad normalizada.

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Para la ilustración de la invención se proporcionan polinucleótidos aislados y purificados que codifican un polipéptido HNF. En algunas realizaciones, el segmento codifica un polipéptido HNF completo. Estos promotores pueden ser utilizados por los expertos en la técnica en muchas diabetes klinik mapa de bad nauheim diversas.

Los siguientes dibujos forman parte de la presente memoria y se incluyen para demostrar adicionalmente ciertos aspectos de la presente invención. Genealogías de las familias MODY3. Los asteriscos indican que estos individuos han heredado el haplotipo de riesgo asociado con MODY3 en esa familia.

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Se han descrito los genotipos y los haplotipos para la familia P Menzel y col. Cada velocidad de infusión fue administrada durante un período de 40 minutos y se diabetes klinik mapa de bad nauheim la glucosa, la insulina y el péptido C a los 10, 20, 30 y 40 minutos de cada período.

Los varones se indican mediante símbolos cuadrados y las hembras mediante círculos. Los diabetes klinik mapa de bad nauheim con NIDDM se indican mediante símbolos negros y aquellos con diabetes de comienzo gestacional o con tolerancia a la glucosa debilitada mediante símbolos sombreados. Una línea diagonal a través del símbolo indica que el individuo ha fallecido. La flecha indica el individuo de cada genealogía en el que fueron rastreadas las mutaciones.

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Obsérvese que algunos individuos han heredado el alelo mutante pero todavía no tienen NIDDM, usualmente debido a su corta edad v. Semejante heterogeneidad ha sido observada previamente Bell y col, y es un reflejo de la elevada prevalencia de la NIDDM. Mapa físico de la región MODY3 del cromosoma Un círculo indica que el clon era positivo para el STS indicado y un cuadrado indica un STS diabetes klinik mapa de bad nauheim del extremo de un clon específico.

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Se muestran las secuencias de los alelos normal y mutante. Existe una inserción de una C en el codón indicado por la punta de flecha en el alelo mutante produciendo un desplazamiento del marco y la terminación prematura. Article source restos idénticos se muestran en recuadros.

La región promotora mínima requerida para la expresión de alto nivel del gen de ratón en células de hepatoma se muestra mediante sombreado. Se indica el codón ATG que define el comienzo de diabetes klinik mapa de bad nauheim traducción. La punta de flecha muestra el polimorfismo de ADN encontrado en la región promotora del probando de la familia J Se muestran las secuencias de los alelos normal Fig.

Los individuos con diabetes klinik mapa de bad nauheim se indican mediante símbolos rellenos y los individuos no diabéticos o no sometidos a ensayo se indican mediante símbolos claros. La flecha indica el probando.

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Se muestran las características clínicas de cada sujeto incluyendo la edad en el momento de la diagnosis, la edad actual y el tratamiento actual. Los miembros de esta familia con MODY y tolerancia a la glucosa debilitada se indican con símbolos de color negro y sombreados, respectivamente. Se indican la edad en el momento del diagnóstico de la diabetes mellitus, la edad actual y la terapia OHA, agentes hipoglucémicos oralesy la naturaleza de las complicaciones M, enfermedad macrovascular; R, retinopatía; y N, polineuropatía periférica.

Se muestra el haplotipo asociado con MODY diabetes klinik mapa de bad nauheim esta familia. El intrón 4 sigue al codón para Gln, CAG. Tolerancia oral a la glucosa sometida a ensayo en la familia Dresden Se muestran los niveles de glucosa en sangre Fig. Efecto del bolo y la infusión de arginina, de glucosa, y de arginina durante la pinza "clamp" hiperglucémica sobre la concentración en plasma diabetes klinik mapa de bad nauheim glucosa Fig.

Respuesta insulínica aguda Fig. Se indican los sujetos con MODY y tolerancia a la glucosa debilitada mediante símbolos rellenos y rayas cruzadas, respectivamente.

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Las características clínicas de los sujetos se marcan debajo de los símbolos incluyendo el tratamiento actual: insulina o agente hipoglucémico oral OHA. Los nucleótidos se numeran con relación al sitio de comienzo de la transcripción del gen humano indicado mediante un asterisco. El triplete ATG recuadrado es la metionina de iniciación. Los guiones indican diabetes klinik mapa de bad nauheim introducidos en las secuencias para generar este alineamiento.

Este boceto muestra los exones y la región promotora como recuadros.

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Genealogía J Los individuos con diabetes mellitus se indican mediante símbolos rellenos. Se diabetes klinik mapa de bad nauheim la edad presente, la edad en el momento del diagnóstico, el tratamiento actual y las complicaciones. Estas figuras describen una secuencia contigua y han sido divididas en paneles debido al tamaño de la secuencia. Se marcan el tamaño aproximado de los espacios en los intrones, cuya secuencia completa no fue determinada.

En la región promotora, se indican los sitios de unión potenciales para los factores de transcripción que pueden regular la expresión de este gen, con los sitios identificados mediante la huella dactilar de la ADNasa en cursiva, aquellos identificados mediante la homología de la secuencia en tipo normal. La región mínima diabetes klinik mapa de bad nauheim los promotores se muestra en negrita.

La letra n indica que la secuencia era ambigua more info este sitio. Estas figuras representan una secuencia contigua y han sido divididas en paneles debido al tamaño de la secuencia. Estas representan una secuencia contigua y han sido divididas en paneles debido al tamaño de la secuencia.

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La presente invención tiene diabetes klinik mapa de bad nauheim ver con la detección temprana, la diagnosis, la prognosis y el tratamiento de la diabetes. Se describen la mutación específica y la identidad de los genes de tipo salvaje correspondientes de sujetos diabéticos.

Se necesita una mejor manera para identificar la población que tiene el riesgo de desarrollar diabetes puesto que un sujeto puede tener composiciones de glucosa en plasma normales pero puede tener el riesgo de desarrollar diabetes evidente. Estos problemas podrían ser resueltos si fuera posible diagnosticar la población susceptible antes del comienzo de la diabetes evidente. En comparación con los sujetos de control sin historial familiar de diabetes, tenían velocidades de secreción de insulina normales a diabetes klinik mapa de bad nauheim de glucosa inferiores.

La magnitud de este efecto cebador de la glucosa fue similar al encontrado en los controles. También resulta preservado el efecto cebador de la glucosa sobre la secreción de insulina Byrne y col. En sujetos con IGT, si bien la curva dosis respuesta que relaciona la glucosa y la secreción de insulina estaba desplazada a la derecha, se conservaba diabetes klinik mapa de bad nauheim efecto cebador de la glucosa sobre la secreción de insulina.

En sujetos con diabetes de Tipo 2 evidente, el incremento de la secreción de insulina en click the following article a un incremento de glucosa estaba notablemente reducido y se perdió el efecto cebador de la glucosa sobre la secreción de insulina. No se ha identificado una fase prediabética evidente en sujetos con mutaciones en la glucoquinasa. Estos sujetos prediabéticos tienen una reducción de las respuestas secretoras de insulina a las elevadas concentraciones de glucosa inducidas por la infusión de glucosa por etapas antes del comienzo de la diabetes.

Estudios adicionales de los autores de la presente invención han mostrado que subidas de los niveles de glucosa en sangre en las 2 horas siguientes a la sensibilización pronostican alteraciones de las respuestas secretoras a la glucosa.

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De los estudios descritos antes y en los Ejemplos que siguen resulta evidente que es importante la identificación y la caracterización del gen o de los genes asociados con la diabetes MODY. Las mutaciones diabetes klinik mapa de bad nauheim tales genes conducen a la diabetes y podría ser ventajoso desde el punto de vista de la diagnosis y la terapéutica identificar las mutaciones en los sujetos predispuestos a tales mutaciones.

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No obstante, la identidad del gen no ha sido aclarada. Con posterioridad, los autores de diabetes klinik mapa de bad nauheim presente invención realizaron estudios para aclarar los defectos genéticos responsables de las otras formas de MODY. Por sí mismos, estos factores juegan un papel crucial en el desarrollo y la diferenciación dictando el patrón de expresión de los genes en células y tejidos específicos.

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La diabetes mellitus altera la transcripción de numerosos genes en muchos tejidos diferentes. Los mecanismos que subyacen a estas alteraciones de la transcripción son desconocidos en gran parte. Estudios de este gen han definido una pequeña región en el promotor, el miniamplificador FF, capaz de conferir actividad transcripcional específica del tejido y sensible a la glucosa en un promotor heterólogo German y col, De los muchos tipos de modificaciones post-traduccionales que podrían regular la expresión génica, se ha prestado mucha atención a la fosforilación, que puede diabetes klinik mapa de bad nauheim en la actividad del factor de transcripción de muchas maneras Hunter y Karin, Se han descrito tres niveles principales de regulación: la fosforilación puede afectar a la actividad de unión al ADN Boyle y col.

Con la excepción de ciertas proteínas de transducción diabetes klinik mapa de bad nauheim la señal Darnell y col. Esta distribución intranuclear depende directamente o indirectamente de la fosforilación de la click the following article, sugiriendo la existencia de un mecanismo de control adicional a nivel de redireccionamiento subnuclear que juega un papel en la regulación de la transcrip- ción.

Los miembros de la superfamilia de los receptores han sido clasificados de varias maneras, una de las cuales es su capacidad para formar dímeros consigo mismos y con otros miembros de la superfamilia.

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Por ejemplo, los receptores de hormonas esteroides, los receptores de glucocorticoides, mineralocorticoides, y de progesterona GR, MR, y PR, respectivamente se unen todos al ADN y activan la transcripción en forma de homodímeros. La base molecular de estos defectos de la secreción en humanos es desconocida, aunque en ratas se ha demostrado que existen cambios globales de la expresión génica en los islotes de animales diabéticos y prediabéticos.

Este defecto en la expresión génica podría ser compatible con el descenso en los niveles de un factor de transcripción maestro cuyos niveles afectan a la expresión de un alineamiento completo de genes aguas abajo. Diabetes klinik mapa de bad nauheim características de la diabetes de tipo MODY son muy similares a las de la diabetes de Tipo 2 de comienzo tardío.

Resulta evidente a partir de la presente invención que los factores nucleares de hepatocitos, su expresión, la regulación y la modificación tienen implicaciones trascendentales en la diabetes.

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Hasta la fecha se pronostica que tres de los cuatro tipos de diabetes MODY identificados afectan a la expresión génica. Otras formas de MODY no pueden ser descartadas, por ejemplo estudios de acoplamiento genético pronostican diabetes klinik mapa de bad nauheim presencia de genes MODY adicionales, cuya localización cromosómica es desconocida en la actualidad. Otra ventaja estriba en la posibilidad de trasladar alteraciones sutiles en los niveles de expresión relativos de los miembros de un par de dimerización a un efecto cuantitativo sustancial en la trascripción.

La Fig.

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Esta observación es sugerida por la presencia de vHNF1 en sistemas que no expresan la mayoría de los productos génicos específicos de hepatocitos Baumhueter y col.

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Otras clases de genes indicadores que confieren características detectables a una célula huésped son aquellas article source codifican polipéptidos, generalmente enzimas, que vuelven a sus transformantes resistentes a las toxinas, v.

No obstante, no se prefieren los indicadores antigénicos diabetes klinik mapa de bad nauheim que, a diferencia de las enzimas, no son catalíticos y de este modo no amplifican sus señales.

Los productos polipeptídicos del gen indicador son secretados, intracelulares, o como se ha observado antes, son péptidos unidos a membranas. En otras circunstancias la señal es modificada con el fin de eliminar las secuencias que prohíben la secreción.

Por ejemplo, la proteína gD de la cubierta del herpes ha sido modificada mediante deleción dirigida al sitio de su dominio de unión transmembrana, facilitando de este modo su secreción EP Preferiblemente, no obstante, los productos del gen indicador son alojados en compartimentos intracelulares o diabetes klinik mapa de bad nauheim la membrana. Después se pueden fijar al recipiente de cultivo, v. El procedimiento de promoción transcripcional que, en su totalidad, conduce al aumento de la transcripción es denominado "activación".

Cualquiera de estos promotores puede ser particularmente preferido en la presente invención. El promotor y el gen indicador pueden ser insertados en un vector replicable y transfectados a un huésped de clonación tal como E.

Asimismo, deben contener tan poco fondo natural como sea posible considerando la naturaleza del polipéptido indicador. Las células que contienen proporciones variables de las sustancias candidato podrían ser después evaluadas en cuanto a la activación de la señal en comparación con los niveles suprimidos.

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